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酶实验:脱氢酶。化学实验

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让我们尝试用动物组织中的酶进行实验。这项新研究的对象是脱氢酶,它参与动物组织呼吸过程。从这些酶的名称可以清楚地看出它们从物质中去除氢原子。稍后您会看到这是如何发生的,但现在请准备好实验所需的一切。

这次你需要以下物质: 5毫升0,5%的甲醛水溶液(用水稀释药用甲醛十倍);等量的0,02%亚甲基蓝水溶液(可以使用稀释的蓝墨水);等量的琥珀酸水溶液,用小苏打小心中和,直至停止冒泡; 10 毫升凡士林或植物油。您还需要温度计和研究对象 - 新鲜牛奶和鸡肉或兔肉。

首先我们来看看鲜牛奶脱氢酶是如何氧化甲醛的。为了使这一点变得明显,需要亚甲基蓝染料的溶液:脱氢酶会从甲醛中除去氢原子,将其转移到容易还原的染料上,然后它就会变色。甲醛会氧化成甲酸。还原后漂白的染料很容易被大气中的氧气氧化而重新变蓝。因此,反应混合物必须用一层油与空气隔离。

给六个试管编号。将1毫升新鲜未煮沸的牛奶倒入试管2和5中,将等量的冷煮牛奶倒入试管3中。

将水浴中的水加热至 37°C。在所有三个试管中加入 0,5 毫升(约 50 滴)甲醛溶液和 5 滴亚甲基蓝溶液。混合物会变成蓝色。每个瓶子中倒入少许油,在表面形成一层薄薄的绝缘层,并将试管 1 和 3 放入水浴中。将试管 2 置于室温下。记下反应开始的时间并观察溶液颜色的变化。不要忘记将结果记在笔记本上。

和以前一样,我们会问您指导性问题。在什么温度下溶液变得无色更快?

酶在煮沸的牛奶中还能保持其活性吗?

如果将空气吹过变色的溶液会发生什么?

在检查结论的正确性之前,请再用脱氢酶进行一项实验,然后考虑这两个实验的结果。

动物肌肉含有一种特殊的酶,琥珀酸脱氢酶。它催化琥珀酸转化为富马酸,同时将除去的氢转移至合适的物质,例如亚甲基蓝。正如他们所说,该反应在无氧条件下发生,无需氧气参与。

将生鸡肉或兔肉(约 10 克)切碎,放在碟子上揉搓。用水和纱布冲洗果肉数次,除去可溶性物质。将洗净的果肉与添加食盐的三倍体积的水(约三分之一茶匙)混合。将稀释后的果肉倒入试管中,每管 4、5、6 - 5 毫升。将试管4浸入沸水浴中4分钟,冷却至室温。然后向试管5和0,5中加入10毫升琥珀酸溶液和6滴亚甲蓝溶液,向试管0,5中加入10毫升水和XNUMX滴染料。在每个瓶子中添加一点油,以将混合物与空气隔离。观察颜色变化后,尝试回答以下问题。

煮熟的肉浆存在时染料会恢复吗?

该反应需要琥珀酸吗?

组织中的酶在高温下的行为是否相似?

现在 - 解释。鲜牛奶中的脱氢酶加速甲醛的氧化反应(这可以通过亚甲蓝的变色来观察)。通过用大气中的氧气氧化还原染料,可以将其恢复为蓝色。牛奶脱氢酶在低温下“发挥作用”缓慢;牛奶煮沸后,完全失去活性。这意味着该酶也具有最佳反应温度。

在肌浆实验中,琥珀酸脱氢酶与所有酶一样,在煮沸后失去活性。在没有琥珀酸的情况下,反应也不会进行(如果您用水充分洗涤浆料,从而除去其中所含的琥珀酸)。该酶很快将琥珀酸氧化为富马酸,将氢原子转移到染料上。

另一项实验使用相同的酶,但对象不同——微生物。到目前为止,您已经处理过动物和植物组织。然而,微生物或许更适合配备酶:毕竟,除了生化酶之外,它们没有其他生存手段。我们将用一种微生物,或者更确切地说是蘑菇,进行一项实验。我们谈论的是普通面包酵母。酵母产生的许多活性酶之一是熟悉的脱氢酶。

将一块压榨酵母放在碟子上,用两茶匙开水研磨。最好用塑料或铝勺研磨。当混合物变得均匀时,将其移入两个试管中。首先必须用肥皂和棉签将其清洗,然后用水冲洗并干燥。使用另一个移液器,向两个试管中添加少许油。

将试管 1 放入沸水中五分钟,然后冷却至室温。在两个试管中加入少许砂糖,轻轻摇动直至糖溶解。使用第三个移液器,将 10-15 滴染料溶液添加到两个试管中。观察溶液的颜色。

实验可能稍微复杂一些;这将需要更多的试管。尝试改变溶液的温度,加入不同量的酵母和砂糖。我们让您自己得出结论,而不提出任何引导性问题。现在你已经积累了足够的经验,你完全有能力做到这一点。

作者:奥尔金 O.M.

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